Den bakterielle endotoksintest (BET) udføres i de fleste moderne laboratorier under kontrollerede forhold som den vigtige faktor for at undgå interferens.
Passendeaseptisk tekniker vigtig ved forberedelse og fortynding af standarder og håndtering af prøver.Kjolepraksis uden for normalt laboratorie personlige værnemidler (PPE) krav er ikke et problem, medmindre det testede produkt kræver specifikke analytiske sikkerhedsovervejelser på grund af toksicitet eller smitsomhed.Handskerbør være TALC-fri, da TALC kan indeholde betydelige niveauer af endotoksiner.Pladelæsere, vandbade og tørre varmeblokkebrugt til prøveinkubation bør være på en laboratoriebænk væk fra varme-, ventilations- og aircondition-kanaler (HVAC), betydelige vibrationer og laboratorietrafik, der kan påvirke testresultaterne.Prøveholdtider og -betingelserbør fastlægges og efterfølgende dokumenteres, hvis det er nødvendigt, for at sikre, at nøjagtige testresultater kan genereres inden for den kvalificerede tid.
Hvis laboratoriet f.eks. modtager en vand til injektion (WFI) eller en prøve under proces, skal den så nedkøles eller kan den forblive ved stuetemperatur, og hvor længe?Inden testning anbefales det, at den eller de primære prøvebeholdere blandes tilstrækkeligt, før testaliquoten(-erne) fjernes til enten direkte testning eller efterfølgende fortynding.
Bioendo Bacterial Endotoxin Test, forsøgene er bl.agel-koagel metodeendotoksin test assay ogkvantitativ endotoksintestanalyse, gelkoagelmetoden endotoksintestanalyse er kvalitativ endotoksindetektion, disse eksperimenter kræver, at forbrugsstofferne er depyrogeneringsbehandling, såsom endotoksinfri reaktionsrør, fortyndingsrør og pyrogenfri spidser;kvantitativ endotoksindetektion har kinetisk kromogen endotoksintest, kinetisk turbidimetrisk endotoksintest, disse eksperimenter kræver, at forbrugsstoffer skal opfylde det højeste niveau af endotoksiner mindre end0,005 EU/ml( 0,001 EU/ml ), såsom endotoksinfri rør, pyrogenfri spidser og pyrogenfri mikroplader, endda pyrogenfri resevoir.Forresten, hvis prøverne behandles, skal beholderen være den endotoksinfri prøveflaske.
Ved endotoksintestning kan interferens opstå fra en række forskellige kilder, såsom prøvematrixkomponenter, testreagenser eller udstyr.
For at undgå eksperimentinterferens kan følgende foranstaltninger tages:
1. Prøveforberedelse: Korrekt prøveforberedelse er afgørende for nøjagtig endotoksintestning.
Prøvematrixen bør testes grundigt og optimeres for at sikre kompatibilitet med endotoksinanalysen.
Især bør forstyrrende stoffer såsom lipider og proteiner fjernes eller minimeres ved hjælp af passende teknikker såsom filtrering eller centrifugering.
2. Positive og negative kontroller: Det er vigtigt at inkludere positive og negative kontroller i analysen for at overvåge for interferens.
Positive kontroller bekræfter testens funktionalitet, mens negative kontroller registrerer enhver forurening eller interferens fra analysekomponenterne.
3. Kvalitetskontrol: Kvalitetskontrol bør udføres på alle reagenser, udstyr og vand, der anvendes i analysen.
Dette sikrer, at reagenserne er fri for endotoksinkontamination og fungerer korrekt.
4. Standardisering: Assayet bør standardiseres for at sikre, at alle resultater er sammenlignelige og reproducerbare.
Dette involverer brugen af en standardkurve til at kalibrere analysen og brugen af standardiserede teknikker til prøveforberedelse, inkubation og detektion.
5. Validering: Assayet bør valideres for at sikre, at det er specifikt, følsomt og pålideligt.
Dette involverer testning af en række prøver, inklusive dem, der vides at indeholde endotoksin, for at bestemme nøjagtigheden og præcisionen af analysen.
Ved at følge disse foranstaltninger kan interferens minimeres, og der kan opnås nøjagtig endotoksintestning.
Posttid: Dec-01-2022
