Chromogen teknik er blandt de tre teknikker, som også indeholder gel-koagel-teknik og turbidimetrisk teknik til at detektere eller kvantificere endotoksiner fra gramnegative bakterier ved at bruge amøbocytlysat ekstraheret fra det blå blod fra hesteskokrabbe (Limulus polyphemus eller Tachypleus tridentatus).Det kunne klassificeres som et endepunkt-kromogent assay eller et kinetisk-chromogent assay baseret på det anvendte assayprincip.
Reaktionsprincippet er, at: amebocytlysatet indeholder en kaskade af serinproteaseenzymer (proenzymer), som kan aktiveres af bakterielle endotoksiner.Endotoksiner aktiverer proenzymerne for at producere aktiverede enzymer (kaldet koagulase), sidstnævnte katalyserer spaltningen af det farveløse substrat og frigiver et gulfarvet produkt pNA.Det frigivne pNA kan måles fotometrisk ved 405 nm.Og absorbansen er positivt korreleret med endotoksinkoncentrationen, så kunne endotoksinkoncentrationen kvantificeres i overensstemmelse hermed.
Indlægstid: 29. september 2019
