Hvad er endotoksintest?

Hvad er endotoksintest?

Endotoksiner er hydrofobe molekyler, der er en del af lipopolysaccharidkomplekset, der danner det meste af den ydre membran af Gram-negative bakterier.De frigives, når bakterierne dør, og deres ydre membraner går i opløsning.Endotoksiner betragtes som de vigtigste bidragydere til det pyrogene respons.Og parenterale produkter forurenet med pyrogener kan føre til udvikling af feber, induktion af inflammatorisk respons, shock, organsvigt og død hos mennesker.

Endotoksintest er testen til at påvise eller kvantificere endotoksiner fra gramnegative bakterier.

Kaniner bruges først til at påvise og kvantificere endotoksiner i farmaceutiske produkter.Ifølge USP involverer RPT overvågning for en stigning i temperatur eller feber efter intravenøs injektion af lægemidlet i kaniner.Og 21 CFR 610.13(b) kræver en kaninpyrogentest for specificerede biologiske produkter.

I 1960'erne fandt Fredrick Bang og Jack Levin ud af, at amebocytter fra hesteskokrabben vil størkne i nærvær af endotoksiner.DetLimulus Amebocyte Lysat(eller Tachypleus Amebocyte Lysate) blev udviklet i overensstemmelse hermed til at erstatte de fleste RPT.På USP omtales LAL-testen som den bakterielle endotoksintest (BET).Og BET kunne udføres ved at bruge 3 teknikker: 1) gel-clot-teknikken;2) den turbidimetriske teknik;3) den kromogene teknik.Krav til LAL-testen indeholder optimal pH, ionstyrke, temperatur og inkubationstid.

Sammenlignet med RPT er BET hurtig og effektiv.BET kunne dog ikke erstatte RPT fuldstændigt.Fordi LAL-analysen kan blive forstyrret af faktorer, og den er ude af stand til at påvise ikke-endotoksin-pyrogener.